血栓能夠造成血管堵塞，引起心肌梗死、腦卒中等疾病。隨著生活質(zhì)量的提高，生活中重油重鹽的飲食習(xí)慣以及不規(guī)律的睡眠，由血栓引起的各種疾病呈現(xiàn)年輕化的趨勢。由血栓性心血管疾病造成的死亡比世界上任何其他疾病都多。血小板不僅在生理上介導(dǎo)止血血栓的形成，防止出血，在閉塞性血栓的形成過程中也起到重要作用。因此，抗血小板治療對于血栓性疾病的治療至關(guān)重要。血小板在血栓形成和止血過程中的作用依賴于粘附受體整合素αIIbβ3。目前，抗血小板藥物要么抑制整合素αIIbβ3的活化，要么直接阻斷αIIbβ3的配體結(jié)合功能。但是，這些藥物又會引發(fā)過度出血，因此，需要開發(fā)對止血影響較小的抗血小板藥物。
伊利諾大學(xué)芝加哥分校的Du Xiaoping團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)合成多肽mP6能在不影響止血的情況下抑制血栓形成。但是，肽類藥物很容易在體內(nèi)降解，不能被有效遞送到靶細(xì)胞內(nèi)腔。常見的遞送載體如脂質(zhì)體等對這類藥物的遞送效率也不足以在臨床使用。近期，Du Xiaoping團(tuán)隊(duì)開發(fā)了一種利用脂質(zhì)體穩(wěn)定的、多肽負(fù)載量高的納米粒子（HLPN），不僅可以負(fù)載高濃度的改性肽M3mP6，還可以在不造成過度出血的情況下有效抑制閉塞的血栓形成。此外，缺血情況下注射M3mP6 HLPN對小鼠心臟缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。該工作以滾動頭條的方式在Science上進(jìn)行推廣，有望正真解決臨床多肽遞送治療血栓面臨的問題。
高負(fù)載多肽的納米粒子作為抗血小板的新型藥物
作者首先將功能肽十八烷基化，并將末端丙氨酸變成亮氨酸，得到改性功能肽M3mP6，不僅保留了多肽mP6抑制Gα13-β3相互作用的功能，還能通過十八烷基插入到脂質(zhì)體的雙分子層中，極大提高多肽的負(fù)載率（70%）。注射用的納米粒子分散液中多肽濃度大于10 mM，是傳統(tǒng)脂質(zhì)體直接負(fù)載mP6多肽的10倍；最外層PEG可穩(wěn)定納米粒子（存放18個月之久），防止多肽在循環(huán)過程中在體內(nèi)降解。改變制備條件，可得到粒徑為6 ~ 25 nm的納米粒子。
M3mP6 HLPN與已有的治療方案進(jìn)行PK
為了凸顯制備的M3mP6 HLPN在臨床的優(yōu)越性，作者將其與已有的多種治療方案（阿司匹林、口服氯吡格雷、氯吡格雷+阿司匹林、坎格雷洛）進(jìn)行了對比，發(fā)現(xiàn)M3mP6 HLPN的治療效果明顯優(yōu)于現(xiàn)階段商用的抗血栓藥物。
經(jīng)過FeCl3誘導(dǎo)損傷后，模型鼠形成穩(wěn)定閉塞血栓的平均時間為199 s，與誘導(dǎo)損傷前15 min經(jīng)過M3mP6 HLPN處理的模型鼠相比有明顯的延遲。阿司匹林治療組的效果與對照組并無明顯區(qū)別，證明M3mP6 HLPN比阿司匹林更有效地抑制FeCl3誘導(dǎo)的血栓形成。
P2Y12抑制劑氯吡格雷是比阿司匹林效果更好的標(biāo)準(zhǔn)抗血小板藥物。口服氯吡格雷能夠有效延遲血栓形成，但效果仍不如M3mP6 HLPN。然后作者選取了臨床效果更好的替格瑞洛進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)M3mP6 HLPN與高劑量的替格瑞洛效果相當(dāng)。M3mP6 HLPN與氯吡格雷或替格瑞洛的聯(lián)合給藥效果（平均血栓閉塞時間分別為762 s和845 s）均優(yōu)于單一用藥，說明M3mP6 HLPN與氯吡格雷及替格瑞洛有較好的聯(lián)合治療效果。不僅如此，M3mP6 HLPN的治療效果甚至高于氯吡格雷+替格瑞洛聯(lián)合用藥，證明了M3mP6 HLPN的臨床優(yōu)越性。
臨床上，在抗血小板治療期間出血的風(fēng)險通常與創(chuàng)傷性干預(yù)有關(guān)，特別是當(dāng)血管壁穿孔時，血管內(nèi)干預(yù)是十分必要的。為了更接近血管內(nèi)出血/手術(shù)過程，作者設(shè)計(jì)了一個頸動脈穿孔手術(shù)出血模型并評估了M3mP6 HLPN和商用坎格雷洛的效果。結(jié)果表明M3mP6 HLPN具有優(yōu)異的抗血小板作用，并且不論對嚙齒（老鼠）和哺乳動物（狗），出血風(fēng)險都極低。此外，M3mP6 HLPN聯(lián)合坎格雷洛并不比單用坎格雷洛有更高的出血風(fēng)險。并且M3mP6 HLPN聯(lián)合小劑量坎格雷洛具有更好的抗栓治療效果，可能是急性抗栓治療的最佳選擇。
最后，作者又利用激光誘導(dǎo)小鼠睪提肌動脈血栓模型，發(fā)現(xiàn)M3mP6 HLPN不僅抑制血小板血栓形成，而且能在體內(nèi)抑制血管內(nèi)凝血，比目前最有效的P2Y12抑制劑坎格雷洛的效果更好。不僅如此，M3mP6 HLPN對小鼠血栓/炎癥和心臟損傷有有效的治療作用，在臨床應(yīng)用方面有巨大的潛力。
本文的亮點(diǎn)
1） 制備脂質(zhì)體穩(wěn)定的HLPN，在體內(nèi)高效遞送功能肽；
2） M3mP6 HLPN能有效抑制血栓形成，并且對小鼠和犬出血無明顯不良反應(yīng)；
3） 注射M3mP6 HLPN可以抑制小鼠的微血管血栓/炎癥，改善心功能和生存率；
4） 開發(fā)了一種抗血小板策略，M3mP6 HLPN與當(dāng)前低劑量抗血小板藥物聯(lián)用，可增強(qiáng)抗血栓作用，同時降低小鼠出血風(fēng)險。
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